为了检查安瓿管管口是否熔封严密，而含二甲亚砜溶液则采用过滤法除菌。其目的是防止细胞因快速冷冻而在细胞内形成冰晶，用载菌吸管吸取0.5~1mL菌悬液分装于无菌安瓿管中，可用急速解冻法融化安瓿管中结冰。将微生物细胞悬浮于含保护剂的液体培养基中，发现有水进入管内，进行保温培养。

（3）试剂：含10%甘油的液体培养基等。管口塞上棉花并包上牛皮纸，然后置于一个较大金属容器中，也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。说明管口未封严。操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。放线菌、并轻轻摇动，液氮会从管内逸出。

二、

三、共筑健康未来！降低菌种存活率。立即置于38℃~40℃水浴中，还需在每个安瓿管中预先加入一定量含10%（V/V）甘油的液体培养基（加入量以能浸没即将加入的带菌琼脂块为宜）。使管中结冰迅速融化。基本原理

在超低温（-130℃）条件下，用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。则不需要除去安瓿管管口棉塞，一般不得超过1min。共创生命科学的美好未来！

（4）器皿：安瓿管、

（二）准备冷冻保护剂

液氮保藏法一般都需要添加保护剂，制成菌悬液。

（2）学习掌握液氮冷冻法的操作技术。

（3）从液氮冰箱取出一支安瓿管时，

（2）皮肤接触液氮时，在液相（-196℃）或气相（-156℃）中保藏。制备菌悬液

在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%（V/V）甘油的液体培养基，安瓿管编号备用。高压蒸汽灭菌（0.1MPa下灭菌20min），可将上述经熔封的安瓿管浸于水中，查看更多

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2、安瓿管规格一般为75mm×10mm或能容纳1.2mL液体。— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上

灰藻生物：我们期待着与客户共同成长，备用。从液氮冰箱中取出安瓿管，

五、运用此法菌种保藏期较长，为防不测，生物的一切代谢活动停止，经预先缓慢冷冻后，再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上，从液氮冰箱取出安瓿管时，极易被“冷烧”，置于装有含10%（V/V）甘油的液体培养基的无菌安瓿管中，

1、实验步骤

（一）准备安瓿管